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如何判斷是色譜柱出現問題導致雙峰出現呢

點擊次數:3045 發布時間:2021-12-28
  明明實驗時只分析一種物質,為什么峰圖會出現雙峰呢?通常情況下,正確的峰型應該是尖銳而對稱的,出現雙峰應該是實驗過程中有錯誤的步驟導致的。液相色譜出現“雙峰”的原因有多。一般有以下幾種原因:色譜柱、溶劑、進樣量、樣品特性和pH值。簡單介紹其中色譜柱、溶劑因素導致出現雙峰及解決辦法。
  如何判斷是色譜柱出現問題導致雙峰出現呢?操作人員分析單一純物時,如果每個色譜峰都出現雙峰,可以確定是色譜柱頭受損或者是柱頭污染了。如果是色譜柱正常,進樣量少并且色譜峰形為一大峰帶一小峰,不一定拖尾,這種情況可能是柱頭受堵。可以將色譜柱反過來接,用流動相或其它溶劑沖洗掉堵在柱頭的殘留物,然后再反過來,一般都能解決。如果反復還是不能解決問題,可能是柱頭塌陷的問題。液相色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上,但是柱子使用一段時間后,可能有一些吸附作用的物質保留于柱頂造成柱頭塌陷,這時可補加填料使柱效恢復。每次使用完色譜柱后,需用洗脫能力的洗脫液沖洗,以延長色譜分析柱的壽命。
  色譜柱頭塌陷的原因有多,比較常見的是色譜泵壓力過,填料壓碎產生空隙。除此之外還有諸如裝填時壓力過低,不密實;流動相溶解填料,造成空隙;色譜柱入口篩板堵塞等原因。色譜篩板能地攔截樣品、流動相或管線及密封件的顆粒物對色譜柱的污染,保護色譜柱和儀器。篩板使用一段時間后,攔截的污染物會堵塞篩板,因此需要定期更換。但是相較于損壞色譜柱,更換一個篩板顯得性價比更,成本更低廉。
  溶劑問題
  反相色譜流動相多為甲醇、乙腈、水,實驗中往往會從中加各種添加劑以改善分離性能。有時候為了樣品的溶解性或穩定性加入了一點的緩沖液,但是緩沖液的酸堿性可能會導致樣品轉化,從而產生雙峰現象。可以更換緩沖液或者更換流動相試一試。
  影響雙峰出現的原因還有多,比如樣品過柱載量,從而導致二次分配;儀器間隔記錄時間太短都有可能造成雙峰出現。因此具體情況要具體分析,以上僅供各位色譜工作者參考。

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